細(xì)胞核提取試劑盒
產(chǎn)品簡介
| 英文名稱 | Nuclear Extraction Kit |
| 儲存條件 | 短期使用可4℃儲存，長期保存請置于-20℃或-70℃。冰袋運(yùn)輸 |
| 規(guī)格 | 50T 100T |
| 單位 | 盒 |
規(guī)格：50T/100T
保存：短期使用可4℃儲存，長期保存請置于-20℃或-70℃。
產(chǎn)品內(nèi)容：
組份 |
| SN0020- |
Lysis Buffer | 100 mL | 200 mL |
Reagent A | 2.5mL | 5mL |
Medium Buffer | 25 mL | 50 mL |
Store Buffer | 5 mL | 10 mL |
產(chǎn)品簡介：
細(xì)胞核提取試劑盒用于從動物細(xì)胞或組織中分離出完整而純化的細(xì)胞核。適合于動物軟組織（肝或腦組織）和硬組織（肌肉）以及培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞核的制備。其制備物產(chǎn)量高，可以被用于細(xì)胞凋亡、信號傳遞、代謝和蛋白組學(xué)等的研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶，性能穩(wěn)定。
操作步驟：1. 樣本處理
a. 組織勻漿：稱取100~200 mg新鮮組織如肝臟、腦、心肌等，PBS或生理鹽水沖洗，洗凈血水，濾紙吸干，用剪刀剪為碎塊放入小容量玻璃勻漿器內(nèi)。加入1.0 mL預(yù)冷的Lysis Buffer，再加入50μL Reagent A，0℃冰浴中上下研磨組織20次；有未研磨開的組織，可用雙層紗布過濾。
b. 培養(yǎng)細(xì)胞勻漿：消化細(xì)胞，PBS洗滌，800 g 離心5~10 min收集細(xì)胞，計數(shù)。每次提取需要5 ×107個細(xì)胞，加入1.0 mL冰預(yù)冷的Lysis Buffer重懸細(xì)胞，再加入50μL Reagent A，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到小容量玻璃勻漿器內(nèi)，0℃冰浴研磨細(xì)胞20~30次。
2. 將組織或細(xì)胞勻漿物轉(zhuǎn)移到1.5mL離心管中，4℃，700g 離心5 min。細(xì)胞核沉淀在收集管底部，棄上清。加入0.5 mL冰預(yù)冷的Lysis Buffer重懸沉淀。
3. 取另一新離心管內(nèi)加入0.5 mL Medium Buffer，吸取上一步的重懸液，沿管壁小心地加入到此離心管中，置于Medium Buffer之上，4℃，700 g 離心5min。細(xì)胞核沉淀在管底。
4. 棄上清，在細(xì)胞核沉淀中加入0.5 mL Lysis Buffer重懸細(xì)胞核沉淀，1000g 離心10min ，棄上清，得到較純的細(xì)胞核沉淀。
5. 用50-100μL Store Buffer 或合適的反應(yīng)緩沖液重懸細(xì)胞核沉淀，立即使用或-70℃保存。
注意事項：
1. 為保證獲得完整的細(xì)胞核，務(wù)必做到：第一，全程低溫操作；第二，快速；第三，在不破壞亞細(xì)胞器的情況下破碎細(xì)胞，這是制備細(xì)胞核的最關(guān)鍵環(huán)節(jié)。與組織塊相比，培養(yǎng)細(xì)胞特別是貼壁培養(yǎng)細(xì)胞在用玻璃勻漿器勻漿時較難破壁，因而要選用小容量玻璃勻漿器、間隙嚴(yán)密的研杵上下研磨培養(yǎng)細(xì)胞。
2. 以離心力g計算正確的離心速度，不同的離心機(jī)可據(jù)此精確計算離心速度。
3. 進(jìn)行Western Blot和2D-膠電泳，可直接加入上樣緩沖液裂解細(xì)胞核。轉(zhuǎn)速與離心力換算: G＝1.11×(10-5)×R×[rpm]2 G為離心力，一般以ｇ（重力加速度）的倍數(shù)來表示； [rpm]2即：轉(zhuǎn)速的平方； R為半徑，單位為厘米。
備注：以上數(shù)據(jù)均來自公開文獻(xiàn), Solarbio暫未進(jìn)行獨(dú)立驗證, 僅供參考。These protocols are for reference only. Solarbio does not independently validate these methods.
公司簡介
上海索萊寶生物科技有限公司是一家集銷售生化試劑、實(shí)驗耗材、自產(chǎn)分子生物學(xué)產(chǎn)品為一體，并能提供的專業(yè)性生物科技公司。公司秉承“以客戶為中心，以產(chǎn)品為保障、以誠信為基礎(chǔ)、以創(chuàng)新為宗旨"的發(fā)展理念，在依靠客戶的大力支持和員工的不懈努力下獲得了快速的成長。公司織結(jié)構(gòu)清晰，內(nèi)部管理科學(xué)，擁有一支既分工細(xì)致又高度合作的年輕化隊伍，保持了各個部門之間的高效合作運(yùn)轉(zhuǎn)，充分保障了公司在充滿競爭的市場中處于地位。公司注重與*合作，目前已與 Amersham、Amresco、Axygen、BD、Corning、Dragon、Eppendorf等企業(yè)結(jié)成緊密的合作伙伴關(guān)系，代理其世界的*產(chǎn)品，并在全國各地設(shè)有分銷機(jī)構(gòu)。我們將以高度的責(zé)任感和出色的產(chǎn)品質(zhì)量為客戶提供高品質(zhì)的產(chǎn)品和實(shí)驗技術(shù)解決方案。豐富的經(jīng)驗、優(yōu)良的品質(zhì)、充足的庫存、準(zhǔn)確的交貨時間、競爭力的價格，所有這些都保證了我們向您提供的是專業(yè)的服務(wù)！立足北京，上海，*，隨著產(chǎn)品營銷戰(zhàn)略的不斷延伸，我們將逐步發(fā)展成為*的專業(yè)性生物科技公司。我們希望能夠和尊敬的客戶一起，利用各自的資源優(yōu)勢和勇于進(jìn)取的敬業(yè)精神，為中國生命科學(xué)研究的發(fā)展作出更多的貢獻(xiàn)。為了更好、更全面的發(fā)展，現(xiàn)公司正在誠招各地代商和招聘若干銷售、研發(fā)人員，歡迎垂詢并期待您的加入！
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