通用RT-PCR試劑盒(M-MLV)

描述：英文名稱Universal RT-PCR Kit(M-MLV)
別名通用RT-PCR試劑盒(M-MLV) 反轉錄試劑盒
儲存條件-20℃，有效期1年
規格25T 50T 100T
單位盒

更新時間：2023-04-27

產品型號：RP1100-25T

所在城市：北京市

廠商性質：經銷商

訪問量：1839

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產品簡介

英文名稱	Universal RT-PCR Kit(M-MLV)
別名	通用RT-PCR試劑盒(M-MLV) 反轉錄試劑盒
儲存條件	-20℃，有效期1年
規格	25T 50T 100T
單位	盒

本試劑盒適用于各種 RNA制品的反轉錄反應以及隨后的PCR擴增。它采用M-MLV進行反轉錄反應，能夠獲得較長的反轉錄產物。同時，在20ul反轉錄體系和50ul PCR反應體系中，還可以一次性得到足夠量的PCR產物用于后續的克隆實驗。本試劑盒中配制的酶均為進口的酶。RT酶采用進口的M-MLV，所以cDNA更長，基因的信息保留得更完整！反轉錄過程中特異的RNase抑制劑可有效降低由于外源RNase污染而導致實驗失敗的風險。本試劑盒使用方便、快捷，可廣泛用于cDNA克隆及目的基因檢測等分子生物學實驗。

通用RT-PCR試劑盒(M-MLV)產品簡介

莫洛尼鼠白血病病毒反轉錄酶（M-MLV RT）是一種RNA依賴的DNA聚合酶，能使mRNA（>5kb）轉錄為cDNA。M-MLV RT的RNase H活性相對于禽成髓細胞瘤病毒反轉錄酶較弱，更適合用來反轉錄較長的mRNA。M-MLV RT應用于以RNA為模板合成cDNA的第一條鏈。

注意：M-MLV RT的延伸性要低于AMV 反轉錄酶，因此要得到和用AMV 反轉錄酶一樣產量的cDNA需加入更多單位的M-MLV反轉錄酶。

通用RT-PCR試劑盒(M-MLV)使用方法

1）使用方法簡介以用2mg總RNA為例。在無RNase離心管中，加入0.5mg引物至含總RNA的樣品中，總體積不大于15ml。70℃，5分鐘打開模板鏈形成的二級結構。立即放于冰上降溫防止二級結構恢復，隨后短暫離心使液體集中在離心管底。

2）加入以下成分到已退火后的引物-模板混合物中。

注意：不要改變引物的加入比率。

M-MLV 5×Reaction Buffer 5ml

dATP，10mM 1.25ml

dCTP，10mM 1.25ml

dGTP，10mM 1.25ml

dTTP，10mM 1.25ml

Recombinant RNasin Ribonuclease Inhibitor 25 units

M-MLV RT 200 units

無核酸水至最后體積 25ml

3）輕輕混勻離心管，如果使用隨機引物在37℃孵育60分鐘，其他引物則42℃孵育。延伸溫度在37～42℃之間最佳。

4）M-MLV RT 用于合成cDNA的第一鏈。往后的合成則需要根據需要自行設計引物再次合成。

通用RT-PCR試劑盒(M-MLV)Buffer組成

M-MLV RT 5×Reaction Buffer

250mM Tris-HCl（PH 8.3 室溫下）

375mM KCl

15mM MgCl₂

50mM DTT

通用RT-PCR試劑盒(M-MLV)來源

大腸桿菌表達純化

通用RT-PCR試劑盒(M-MLV)保存條件

-20℃保存。避免經常凍融。

備注：以上數據均來自公開文獻, Solarbio暫未進行獨立驗證, 僅供參考。These protocols are for reference only. Solarbio does not independently validate these methods.

公司簡介

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