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想知道什么是過氧化氫測(cè)試盒？看看這些吧
更新時(shí)間：2021-07-20 | 點(diǎn)擊率：1783
過氧化氫是生物體內(nèi)最常見的活性氧分子，主要由SOD和XOD等催化產(chǎn)生，由CAT和POD等催化降解。H2O2不僅是重要的活性氧之一，也是活性氧相互轉(zhuǎn)化的樞紐。
一方面過氧化氫可以直接或間接地氧化細(xì)胞內(nèi)核酸，蛋白質(zhì)等生物大分子，并使細(xì)胞膜遭受損害，從而加速細(xì)胞的衰老和解體;另一方面 H2O2也是許多氧化應(yīng)急反應(yīng)中的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子。
過氧化氫測(cè)試盒是基于Feinberg和Vogelstein發(fā)明的隨機(jī)引物標(biāo)記法而開發(fā)出來的即用型DNA探針標(biāo)記試劑盒，標(biāo)記過程由雙鏈DNA熱變性、隨機(jī)引物與單鏈DNA結(jié)合、在KlenowDNA聚合酶催化下，引物的延伸合成DNA探針并摻入標(biāo)記的核苷酸三步組成。
過氧化氫測(cè)試盒是一種在較高溫度下保存 RNA 樣品的非凍型無毒溶液，它能迅速滲入細(xì)胞內(nèi)，通過高效抑制 RNase 的活性而保存 RNA 的完整性。
下面讓我們來了解一下過氧化氫測(cè)試盒的應(yīng)用領(lǐng)域吧
過氧化氫測(cè)試盒對(duì)Feinberg和Vogelstein經(jīng)典方法進(jìn)行了改良，具有下列特點(diǎn)：
1.提供的標(biāo)記反應(yīng)液整合了除酶和模板外的所有成分，簡(jiǎn)化了反應(yīng)加樣步驟，提高了標(biāo)記反應(yīng)的可重復(fù)性。
2.使用無外切活性的Klenowexo-DNA聚合酶，已標(biāo)記DNA探針不會(huì)被酶降解。
3.快速1小時(shí)即可完成標(biāo)記反應(yīng)。
4.得到的DNA探針比活性高(如果是同位素，可以達(dá)到109cpm/ugDNA)。
5.所需模版DNA量少，可以是各種形狀(線狀和環(huán)狀)的、也可以是單鏈或雙鏈的，但長(zhǎng)度必須在100bp以上。
6.得到的探針長(zhǎng)度在200-400nt之間，可以用于Southern雜交、Northern雜交、原位雜交、菌落和斑點(diǎn)印跡雜交等。
7.提供三種標(biāo)記選擇，其中90603A可用于各種同位素和非同位素標(biāo)記，但需自備標(biāo)記底物;90603B和90603C可分別用于生物素和標(biāo)記，不需自備標(biāo)記底物。